以下是關于人白介素12(IL-12)ELISA試劑盒的說明書核心內容整理: 一、檢測原理? 采用雙抗體夾心法,通過預包被抗人IL-12抗體捕獲樣本中的IL-12,再與生物素標記的二抗及HRP酶聯物結合,最終經TMB顯色定量檢測。 二、試劑盒組成? 組分? ?規格? ?保存條件? 預包被酶標板 96孔/板(12孔×8條) 2-8℃干燥保存 重組IL-12標準品 2ng/瓶或10ng/管 -20℃凍存 HRP標記檢測抗體 6-12ml/瓶 2-8℃避光 TMB底物液 12ml/瓶 2-8℃避光 20×濃縮洗滌液 50ml/瓶 室溫(使用前稀釋) 三、樣本要求? 類型?:血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細胞上清液、組織勻漿 處理?: 避免溶血或反復凍融; 含NaN3的樣本需透析處理(NaN3抑制HRP活性); 短期保存于-20℃,長期保存需-80℃。 四、操作步驟? 標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如60ng/L→3.75ng/L); 加樣溫育?: 樣本/標準品50μL/孔,37℃孵育60分鐘; 加入HRP標記抗體100μL/孔,繼續孵育60分鐘; 洗滌?:手工洗板需重復5次,拍干; 顯色?:加入TMB底物50μL/孔,避光反應15分鐘; 終止與檢測?:加終止液50μL/孔,15分鐘內450nm測OD值。 五、技術參數? 項目? ?規格? 檢測范圍 15.63-2000pg/mL(不同品牌差異) 靈敏度 <5.47pg/mL 批內/批間精密度 CV<8%/CV<10% 有效期 6個月(2-8℃保存) 六、注意事項? 安全操作?: 避免接觸終止液(含硫酸)和TMB底物,接觸后立即沖洗; 質量控制?: 標準曲線R2需≥0.99; 空白孔OD值應<0.1。 適用范圍?:僅限科研,不用于臨床診斷。 如需具體品牌操作細節,請參考對應試劑盒說明書。 注:以上資料僅供參考,不作為實際標準,如需更詳細的標準對比,可進一步詢技術老師或是供應品牌商。 |